一代测序（Sanger法测序）
介绍
一代测序技术指的是由1975年Frederick Sanger发明的Sanger双脱氧链终止法（Chain Termination Method）。基于第一代测序技术的测序仪几乎都是采用该方法。其核心原理是采用ddNTP取代dNTP，在合成核酸链的过程中ddNTP无法形成磷酸二酯键，从而导致DNA合成反应中断。对每个ddNTP进行荧光标记，产生以A、T、C、G结束的四组不同长度的一系列核苷酸，然后通过毛细管电泳进行分离，通过检测荧光信号获得DNA序列。
优点
1. 一代测序技术的准确性远高于二、三代测序，因此被称为测序行业的“金标准”；
2. 一代测序每个反应可以得到700-1000bp的序列，序列长度高于二代测序；
3. 一代测序价格低廉，设备运行时间短，适用于低通量的快速研究项目。
缺点
1. 一代测序技术一个反应只能得到一条序列，因此测序通量很低（通量：指的是单位时间内所能产生的数据量）；
2. 一代测序技术虽然单个反应价格低廉，但是获得大量序列的成本很高。
应用
1. PCR产物测序
对目的基因的PCR产物进行测序，得到目的基因序列；
2. 重测序
突变、SNPs、插入或缺失克隆产物的验证；
3. 分型分析
微生物和真菌分类学鉴定、HLA分型、病毒分型等；
4. 临床应用
肿瘤突变基因的检测和肿瘤个体化治疗，致病基因位点明确并且数量有限的单基因遗传病检测；
5. 对新一代测序技术的结果进行验证。
